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基因工程原理

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问答题

案例分析题

在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind  Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。

绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl 的限制性图谱,并标明四环素抗性基因的位置;

【参考答案】

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问答题 计算下列三种酶各自在某染色体 DNA 序列上识别位点间的平均距离:

填空题 DNA连接酶的单位通常用 Weiss 单位表示,一个 Weiss单位是:()。

填空题 原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶:E.coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶,它是从 T4 噬菌体感染的 E.coli 中分离的种单链多肽酶,分子量为——』Oa,由 T4 噬菌体基因——编码。E.coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码,也是一条多肽链的单体,分子量为()kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异:第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同,TDNA连接酶用(),而 E.coli DNA连接酶则用()作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同,在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E.coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件,E.coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的()。

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